The involvement of gonadotropins and gonadal steroids in the ovulatory dysfunction of the potamodromous Salminus hilarii (Teleostei: Characidae) in captivity.

Potamodromous teleosts that require migration to reproduce show dysfunctions that block ovulation and spawning while in captivity. To understand the physiological basis of these reproductive dysfunctions, follicle-stimulating hormone b subunit (fshb) and luteinizing hormone b subunit (lhb) gene expression analyses by real-time quantitative PCR, together with measurements of estradiol (E 2), 17α-hydroxyprogesterone (17α-OHP) and 17α,20ß-dihydroxy-4-pregnen-3-one (17α,20ß-DHP) levels, were carried out throughout the reproductive cycle of the potamodromous Salminus hilarii. The following reproductive stages were evaluated in captive and wild females: previtellogenic (PV), advanced maturation/mature (AM) and regression/spent (REG/SPENT). In the wild females, fshb expression decreased from the PV to the AM stage, and the opposite pattern was detected for E 2, which increased from the PV to the AM stage. fshb was expressed at lower levels in captive than in wild females, and this difference did not change during the reproductive cycle. lhb expression also increased from the PV to the AM stage in both groups, but the wild females at the AM and REG/SPENT stages showed higher lhb expression levels than the captive females. The concentrations of 17α-OHP did not change during the reproductive cycle, and the levels were higher in the captive than in the wild females at all reproductive stages. 17α,20ß-DHP levels did not change between wild and captive females. However, in captive females, the transition from PV to AM stage was followed by an increase in 17α,20ß-DHP levels. These data indicate that dysfunctions in the gonadotropins and steroids synthesis pathways cause the ovulation failure in captive S. hilarii.

Suplementação proteica não aumenta a concentração plasmática de óxido nítrico em homens saudáveis / Protein supplementation does not increase nitric oxide plasmatic concentration in healthy men

Suplementos nutricionais, supostamente, capazes de potencializar a produção endógena de óxido nítrico (NO) têm experimentado crescente popularidade entre os indivíduos fisicamente ativos. Diante da carência de informações sobre o assunto, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de um suplemento comercial à base de proteínas e aminoácidos sobre a produção endógena de NO. MÉTODOS: A amostra foi constituída de 12 homens sedentários, mas sem fatores de risco para doenças cardiovasculares. O protocolo de suplementação foi conduzido conforme o arranjo experimental duplo-cego cruzado. Os participantes receberam, aleatoriamente, placebo (PLA) ou suplemento proteico (SP), em dois momentos diferentes, separados por uma semana. Com o intuito de determinar a concentração plasmática de NO, amostras de sangue foram coletadas antes (24h e imediatamente antes) e depois (30 e 60 minutos) do consumo da substância PLA ou do SP. RESULTADOS: Não foi observada alteração na concentração plasmática de NO após a ingestão do SP em comparação com o PLA (pós- suplementação 30min - PLA: 19,3 ± 4,7µmol.L- 1 vs. SP: 18,9 ± 4,4µmol.L-1 e pós-suplementação 60min - PLA: 21,3 ± 6,5µmol.L-1 vs. SP: 20,3 ± 4,9µmol.L-1). Também não foi verificada alteração da pressão arterial. CONCLUSÃO: O suplemento nutricional à base de proteínas e aminoácidos, testado no presente estudo, não potencializou a produção endógena de NO.

Nutritional supplements, theoretically able to increase endogenous nitric oxide (NO) production have experienced great popularity among physically active individuals. AIM: scientific evidence available regarding this issue is scarce. Therefore, the purpose of this study was to evaluate the effect of a dietary supplement commercialized as a nitric oxide booster. MATERIALS AND METHODS: twelve sedentary men with no risk factors for cardiovascular diseases were supplemented with placebo or protein in two different occasions. The present study was conducted in a cross double-blind design. In order to assess plasmatic NO concentration, blood samples were obtained before (24hs and immediately before) and after (30 and 60 minutes) consumption of placebo (PLA) or protein supplement (SP). RESULTS: there was no difference in plasmatic nitric oxide concentration between both trails (Post-supplementation 30 min - PLA: 19.3±4.7 µmol.L-1 vs. SP: 18.9±4.4 µmol.L-1 and Post-supplementation 60 min - PLA: 21.3±6.5 µmol.L-1 vs. SP: 20.3±4.9 µmol.L-1). In addition, no difference was detected for arterial blood pressure. CONCLUSION: the dietary supplement analyzed in the present study failed to increase nitric oxide endogenous production.

Molecular cloning and sequence analysis of growth hormone cDNA of Neotropical freshwater fish Pacu (Piaractus mesopotamicus)

RT-PCR was used for amplifying Piaractus mesopotamicus growth hormone (GH) cDNA obtained from mRNA extracted from pituitary cells. The amplified fragment was cloned and the complete cDNA sequence was determined. The cloned cDNA encompassed a sequence of 543 nucleotides that encoded a polypeptide of 178 amino acids corresponding to mature P. mesopotamicus GH. Comparison with other GH sequences showed a gap of 10 amino acids localized in the N terminus of the putative polypeptide of P. mesopotamicus. This same gap was also observed in other members of the family. Neighbor-joining tree analysis with GH sequences from fishes belonging to different taxonomic groups placed the P. mesopotamicus GH within the Otophysi group. To our knowledge, this is the first GH sequence of a Neotropical characiform fish deposited in GenBank.

Resposta cardiovascular materna e fetal ao exercício isométrico / Maternal and Fetal Cardiovascular Responses to Isometric Exercise

O objetivo do presente trabalho foi verificar o efeito do exercício isométrico com variação no percentual da contração voluntária máxima e no tamanho dos grupos musculares recrutados sobre a resposta cardiovascular materna e fetal. Materiais e métodos: A amostra foi constituída de 37 mulheres saudáveis, sedentárias que foram divididas em dois grupos, grávidas (n=13) e não grávidas (n=24). No primeiro dia foi determinada a contração voluntária máxima (CVM) nos dinamômetros de preensão manual e no de extensão de costas e pernas. No dia seguinte foram realizados testes a 30% e 50% dos valores previamente obtidos em ambos os dinamômetros. Resultados: O percentual da contração voluntária máxima não afetou a freqüência cardíaca materna e fetal quando uma menor massa muscular foi recrutada (dinamômetro de preensão manual). Quando uma grande massa muscular foi acionada (dinamômetro de extensão de costas e pernas) o principal fator na determinação da freqüência cardíaca materna e fetal não foi o percentual da contração voluntária máxima, mas a própria quantidade de massa muscular. Conclusão: Em atividades isométricas a quantidade de músculos recrutados é mais importante que a intensidade da contração para o aumento da freqüência cardíaca materna e fetal. O aumento para a freqüência cardíaca fetal, entretanto, não ultrapassou o limite considerado seguro de 160 batimentos por minuto.

Aim: The aim of present study was verify the effect of isometric exercise with different intensities of contraction and quantity of muscle mass recruited upon maternal e fetal cardiovascular response. Materials and methods: Thirty-seven women were divided in pregnant (n=13) and non-pregnant (n=24). Initially was determined the maximal voluntary contraction to hand-grip dynamometer and to back-leg extension dynamometer. After that, tests were performed at 30% and 50% of maximal voluntary contraction using the two dynamometers. Results: The percentage of maximal voluntary contraction did not affect maternal and fetal cardiovascular response when a small amount of muscle (handgrip) was recruited. When a great amount of muscle mass was activated maternal and fetal heart rate increased independently of the percentage of maximal voluntary contraction (30% or 50% MVC). Conclusion: To isometric contractions the size of muscle mass recruited is more important in determine maternal and fetal cardiovascular response than the percentage of maximal voluntary contraction.

Trypanosoma cruzi induces edematogenic responses in mice and invades cardiomyocytes and endothelial cells in vitro by activating distinct kinin receptor (B1/B2) subtypes.

Trypanosoma cruzi, the protozoan that causes Chagas' heart disease, invades endothelial cells in vitro by activating the B2 kinin receptor (B2R). Here, we demonstrate that mice infected with trypomastigotes develop potent edema after treatment with the angiotensin-converting enzyme (ACE) (or kininase II) inhibitor captopril. Experiments performed with specific kinin receptor (B2R/B1R) antagonists and knockout mice revealed that the early-phase (3-h) edema is mediated by the constitutive B2R, whereas the late-phase (24-h) response depends on stimulation of the up-regulated B1R. Given previous evidence that parasite invasion of cells expressing B2R is potentiated by captopril, we investigated the prerequisites for in vitro infection of Chinese hamster ovary cells overexpressing either B1R or B2R, human umbilical vein endothelial cells activated by lipopolysaccharide, and neonatal rat cardiomyocytes. Our results indicate that captopril potentiates parasite invasion regardless of the kinin (B2/B1) activation pathways, whereas DL-2-mercaptomethyl-3-guanidino-ethylthiopropanoic acid (MGTA), an inhibitor of kininase I (carboxypeptidase M/N), selectively decreases parasite infectivity for B1R-expressing cells. These data suggest that formation of the B1R agonist, i.e., [des-Arg] kinins, critically depends on the processing action of kininase I, here proposed as a potential pathogenesis cofactor. Collectively, our data suggest that fluctuations in the levels of kininases may modulate parasite infectivity and pathological outcome in Chagas' disease.

Geraçäo e caracterizaçäo do camundongo nocaute para o receptor B1 de cininas / Generation and characterization of kinin B1 receptor knockout mice

Com o objetivo de investigar a função biológica do receptor B1 das cininas geramos camundongos geneticamente modificados deficientes para este receptor, pelo método de recombinação homóloga. A deleção do gene foi verificada no DNA genômico dos animais nocautes e também pela ausência de expressão do RNAm do receptor no íleo, estômago e rim mesmo após tratamento com LPS, que induz a expressão do gene. Além disso, também foi verificada a perda de funcionalidade do agonista do receptor B1, Des-Arg9-BK na preparações de íleo, útero e estômago isolados. Os animais nocautes para o receptor B1 são férteis, viáveis e normotensos, sendo entretanto a presença do receptor B1 essencial para o efeito hipotensor promovido pelo LPS no choque séptico. Quando comparados aos animais selvagens, os camundongos nocautes são maiores e mais pesados ao nascimento, e esse aumento de massa mantém-se pelo menos até o terceiro mês de vida. Foi ainda verificado aumento de ingestão alimentar absoluta e uma diminuição de ingestão relativa, indicando um maior aproveitamento dos nutrientes, ou menor gasto calórico pelos animais nocautes. Os camundongos nocautes apresentaram maior atividade das enzimas liberadoras de óxido nítrico, podendo ser um dos fatores responsáveis pelas diferenças na ingestão alimentar. A indução de um processo inflamatório crônico pela administração de baixas doses de LPS, seguida de uma dose letal produziu o efeito de tolerância tanto nos animais selvagens como nos nocautes, com diminuição de celularidade da medula óssea. Entretanto, diferentemente dos animais selvagens que responderam ao tratamento com aumento no sangue de neutrófilos maduros e jovens, os nocautes não exibiram aumento de neutrófilos circulantes, Ambos os grupos apresentaram anemia após as administrações de LPS sendo essa mais acentuada nos nocautes. O baço é o principal órgão de destruição das hemácias e de grande importância para a diminuição dos neutrófilos circulantes. Os animais nocautes apresentam aumento da massa do baço em condições de normalidade e essa diferença se acentua na tolerância, podendo estar este fenômeno envolvido nos distúrbios hematológicos observados nos animais nocautes após o tratamento com LPS. A importância do receptor B1 na migração de neutrófilos foi avaliada pela indução de uma inflamação peritonial por caseinato, sendo observada uma menor quantidade de neutrófilos na cavidade abdominal dos animais nocautes após este tratamento. Além ...(au)